1 材料與方法
APP-PS1-HEK293細(xì)胞株 購(gòu) 自 上 海 酶 聯(lián) 科 技 有 限公司;ICT 純度大于或等于98%(高效液相色譜法) 購(gòu)自南京澤朗醫(yī)藥科技有限公司,使用甲醇配制成10 μmol/L備用;ELISA 測(cè)定試劑盒(DAB140B)購(gòu)自美 國(guó) R&D Systems 公 司;PrimeScript RT 試 劑 盒 (RR047A)和 SYBRPremixExTaq(RR820A)購(gòu) 自 日本 TaKaRa生物技術(shù)有限公司;β位 淀 粉 樣 前 體 蛋 白裂解酶1(BACE1)抗體(ab2077)、早老素1(PS1)抗 體(ab76083)、解整合素金屬蛋白酶10(ADAM10)抗 體(ab1997)、Aβ1-40 抗 體 (ab20068)和 GAPDH 抗 體 (ab8245)購(gòu)自英國(guó) Abcam 公司。辣根過(guò)氧化物酶標(biāo) 記的山羊抗小 鼠 或 兔IgG 抗 體(M21003L)購(gòu) 自 上 海 艾比瑪特生物醫(yī)藥有限公司,微孔板快速振蕩器(其林貝爾QB-9002)。
2 結(jié) 果
淀粉樣前體蛋白(APP)代謝異常所致的 Aβ沉積 是導(dǎo)致 AD 的 重 要 病 理 基 礎(chǔ)。正 常 情 況 下,APP 有非淀粉樣代 謝 途 徑 和 淀 粉 樣 代 謝 途 徑2條 代 謝 途 徑,以非淀粉樣代謝途徑為主。APP 被 α-分 泌 酶 切 割,產(chǎn)生具有可溶性片段sAPPα和 C 末端片段 C83, C83進(jìn)一步被γ-分泌酶裂解產(chǎn)生非致病性的 P3多肽 和 APP胞內(nèi)區(qū)(AICD)。α-分 泌 酶 的 切 割 點(diǎn) 位 于 Aβ 結(jié)構(gòu)域 內(nèi) 部,能 阻 止 完 整 Aβ 的 生 成。
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